本文设计合成的嘧啶苄基异羟肟酸类双靶点抑制剂可能是由于其多靶向性而明显提高抗肿瘤细胞增殖活性。所以,作用于不同的肿瘤通路的双靶点或多靶点抑制剂,具有较好的研究前景,可能成为将来肿瘤治疗领域的重要策略。
目的研究UHRF2与组蛋白H3乙酰化(H3K9ac和K3K14ac)的相互作用及两者相互作用结合区域的鉴定。探讨UHRF2分别在正常细胞和癌细胞中对K3K9ac和H3K14Dinaciclibac的影响及其分子机制。方法1. 在HEK293、LO2和HepG2细胞中转染UHRF2,进行免疫荧光后,激光共聚焦检测UHRF2与组蛋白H3、H3K9ac和H3K14ac在细胞内的共定位现象。再在上述细胞中转染UHRF2和空载质粒,采用免疫沉淀技术,研究UHRF2与H3K9ac和H3K14ac的相互作用。2. 通过双酶切鉴定UHRF2各缺失体质粒Gefitinib研究购买,将各缺失体质粒转染HEK293、LO2和HepG2细胞,进行免疫沉淀实验。研究UHRF2与H3K9ac和H3K14ac相互作用的结合区域。3. 通过免疫印迹和免疫组化化学方法检测内源性UHRF2、H3、 H3K9ac和H3K14ac蛋白在HEK293、LO2和HepG2细胞中以及在肝癌和癌旁组织中的表达情况。4. 采用瞬时转染技术上调UHRF2蛋LBH589白,通过免疫印迹检测UHRF2在HEK293、LO2和HepG2细胞中对H3K9ac和H3K14ac影响。同时通过免疫组织化学检测肝癌标本中UHRF2蛋白水平的高低与H3K9ac和H3K14ac蛋白表达情况的相关性。结果1. 激光共聚焦实验结果显示：UHRF2与H3、H3K9ac和H3K14ac在HEK293、LO2和HepG2细胞内均有存在共定位现象。免疫沉淀实验结果表明:UHRF2与H3K9ac在上述细胞中相结合存在相互作用。

在美国,鳞状细胞癌占肺癌新增患者的30%左右[1]。临床研究结果显示,随着针对肺腺癌的新型治疗方案的出现,转移性肺腺癌患者与转移性肺鳞状细胞癌患者相比,前者的临床获益较后者有明显的改善和提高[2]。目前,虽然还没有对肺鳞癌进行完整的基因组分析,但许多研究表明在肺鳞癌细胞中存在体细胞的拷贝数
结肠直肠肿瘤的发生、发展与多种生长因子密切相那个关,胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)及其受体(IGF-1R)与肿瘤的关系是近年研究的热点。研究表明,IGF是促肿瘤生长的因子,其活性主要通过IGF-1R介导,且IGF-1R在多种恶性肿瘤中表达上调。IGF-1R通过促进细胞增殖、抑制细胞凋亡等实现促瘤作用,同时与诱已经导和保持肿瘤细胞的表型及其浸润、转移密切相关[1]。IGF家族与结肠直肠癌、前列腺癌、乳腺癌、非小细胞型肺癌和肾上腺皮质癌等的发生相关,这种关系决定了其在肿瘤诊断和治疗中的重要性。本文就近年来IGF家族在肿瘤特别是结肠直肠肿瘤
目的探讨胰岛素样生长因子I受体(insulin-like growth factoRapamycinr I receptor,IGF-ⅠR)抑制剂OSI-906体外抗细粒棘球绦虫原头蚴作用。方法体外培养细粒棘球绦虫原头蚴,用6个浓度梯度(100、50、25、12.5、6.25、3.125μmol/L)的OSI-906进行干预,分别于给药后1、2、3、4d用伊红染色,在倒置荧光显微镜下观察其活力(每组设置3个复孔),绘制原头蚴活力曲线;透射电镜下观察不同浓度OSI-906组原头节超微结构变化。

结果 以肺癌中与STAT3存在相互作用的蛋白质为基础,构建蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction, PPI)。之现113个蛋白与STAT3相互作用,涉及至少23条与肺癌显著相关的生物学过程、分子功能及信号转导通路；将其进行功能聚类后与EML4-ALK融合型肺癌中出现异常表达selleck MAPK inhibitor的基因集求交集(与非ALK融合型非小细胞肺癌比较,ALK融合型肺癌存在83个异常表达基因。见第一部分第二章结果部分),发现STAT3调节的ALK、GHR两个分子在EML4-ALK型肺癌中异常表达；STAT3参与调节的Wnt通路在EML4-ALK融合型肺癌中也表达失调。 结论 STAT通常3通过与ALK的直接相互作用,可能参与EML4-ALK融合型肺癌的发生与增殖；该基因调节的Wnt等信号通路在EML4-ALK融合型肺癌中亦存在异常。这些发现揭示了STAT3在EML4-ALK融合型肺癌中的重要作用,有必要对STAT3基因的功能在EML4-ALK融合型肺癌中的作用进行进并且一步验证。 第二章模式细胞中STAT3的表达对其生物学特性的影响 目的 根据生物信息学分析,STAT3在EML4-ALK融合型肺癌中发挥了重要的信号转导功能。本研究应用表达载体介导的RNAi技术及分子克隆技术,构建STAT3干扰或过表达载体并通过在模式细胞中控制该基因表达,探索EML4-ALK融合型肺癌中沉默或上调STAT3信号通路后肿瘤细胞生物学行为的改变。

通过克隆形成实验和CCK8细胞增殖-毒性检测实验，筛选对PARP抑制剂PHE敏感的细胞，用于筛选PARP抑制剂的细胞模型。 实验结果表明，本论文成功构建了pFast-hPARP1质粒，通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统，实现了hPARP1酶在Sf9昆虫细胞中的表达，产物经3-氨基苯甲酰胺柱亲和层析成功得到纯化，得率为80.8%，纯化倍数为3selleck化学药品8.72倍，比活达到1.988U/μg。SDS-PAGE和Western blotting结果显示纯化产物在116kDa处有特异性目标条带。PARP抑制剂体外筛选结果显示，在72种化合物中筛选出41个具有生物活性的PARP抑制剂，其中有7个化合物的IC_(50)低于500nmol/L，显示出良好的PARP抑制作用。细胞模获悉更多型筛选结果显示，中国人源胰腺癌细胞JF305对PARP抑制剂菲啶酮具有一定的敏感性。CCK8结果显示，筛选获得的PARP抑制剂HC-232（A）具有明显抑制JF305细胞的生长作用。 本课题通过分子构建、表达、纯化等步骤获得了hPARP1。利用hPARP1，成功筛选出具有一定生物活性的PARP抑制剂。获得了对PARP抑制寻找更多剂菲啶酮敏感的中国人源胰腺癌细胞JF305，这为筛选出具有自主知识产权的PARP抑制剂奠定了基础，并对后续研究提供了理论依据。
研究背景： 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年上升,40-70岁是乳腺癌的高危年龄。据统计,全世界每年约有130万人诊断为乳腺癌,50万人死于乳腺癌,乳腺癌已经成为妇女健康的最大威胁之一。 乳腺癌的治疗手段目前主要有手术、放疗、化疗、内分泌治疗及分子靶向治疗等。

考虑到化合物结构的新颖性和多样性,我们尝试设计并合成一类7-氮杂吲哚醌为母核的化合物,共计17个。但体外肿瘤细胞增殖抑制活性测定结果表明,该类化合物抗肿瘤活性很弱,故对新型cDK2抑制剂的设计仍需要进一步的探索。
慢性粒细胞性白血病(Chronic myelogenous leukemia) CML是一种髓细胞增殖紊乱性疾病,起源于造血多能干细胞的恶性增生。95%以上的CML患者细胞哪里中都存在有费城染色体(Ph+)易位形成的Bcr-Abl融合基因,该融合基因是CML的致癌基因。 甲磺酸伊马替尼(Imatinib mesilate),商品名为格列卫(Gleevec, Glivec),是第一个作用于Bcr-Abl酪氨酸激酶的选择性抑制剂,临床上用于CML慢性期患者的治疗取得了显著的疗效,但治疗过程产生的耐药性问题也日益凸显。受体结合位点的基因突那个变是产生耐药的主要原因,Schindler等研究者通过对伊马替尼与Abl激酶的复合物的晶体学研究表明基因突变导致产生耐药的原因：改变了激酶的非活性构象使药物与受体不能有效的结合；降低了药物与受体的结合力。 开发克服伊马替尼耐药的新的小分子酶抑制剂成为近年来药学领域的研究热点。本论文简述了慢性粒细胞性白血病的分子生物学成因,Bcr-Abl受体的结构及基因组特征,所以总结了用于慢性粒细胞性白血病治疗的靶向药物的研究进展。论文研究以伊马替尼为先导化合物,从寻找新的结合方式增强与受体亲和力方面着手进对先导化合物进行结构修饰,共设计并合成了65个未见文献报道的2-芳胺基嘧啶衍生物。按照结构的不同可分为五个系列：6个2-取代氨基乙酰胺类衍生物(A1～A6)、6个苯氧乙酰胺类衍生物(B1～B6)、10个芳酰基硫脲类衍生物(C1～10)、40个肉桂酰胺类衍生物(D1～D40)、3个苯丙酰胺衍生物(E1～E3)。