8%,共4.38%经粪便排泄。仅有少量VBE-6(0.34%)以原型药物形式经粪便排泄。 对VBE-6及其三个代谢产物进行的体外乳腺癌MCF-7细胞抗肿瘤试验结果表明,三个代谢产物均保持较强的抗肿瘤活性,与母药VBE-6活性相近。 因此,本课题完成了VBE-6的合成制备工艺建立,并对其大鼠体内进行了研究,结果表明,与VBE-1相比,大鼠口服给药VBE-6后,在体内不经历代谢失活历程,体外抗人乳腺癌MCF-7细胞试验中代谢产物依然保持较强的抗肿瘤活性。本课题的代谢数据将对VBE-6的临床前药理学及毒理学等方面的研究起到很好的辅助及补充作用,并为VBE-6抗肿瘤机制的深入研究提供基础,对开发应用前景良好的候选药物VBE-6具有深远的意义。
细胞信号转导在细胞的代谢、分裂、分化、生物功能及凋亡过程中起着重要作用,肿瘤的发生和发展与细胞的过度激活有关。PI3K/Akt信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一,通过影响下游多种效应分子的活化状态,在细胞内发挥着抑制凋亡和促进增殖的关键作用。由于PI3K是肿瘤的一个重要靶点,PI3K抑制剂的研究吸引了广泛的关注。近年来,数个PI3K抑制剂已经进入临床研究阶段,包括PX-866、SF-1126、NVP-BEZ235、XL-147、GDC-0941、ZSTK474、GSK-615和GSK2126458。

噻吩并[3,2-d]嘧啶系列衍生物,作为一类新型PI3K制剂已经被广泛研究。通过对这些化合物的合成和生物活性的研究发现,GDC-0941具有很好的活性,其抑制活性分别为IC50=3、33、3和75 nM(PI3Kα、β、δ和γ),现正处于Ⅰ期临床研究阶段。我们以GDC-0941为先导物,用各种取代的三氮唑基替换了GDC-0941分子中噻吩环系上的4-甲磺酰哌嗪-1-基亚甲基结构,主要是考察芳杂环能否代替非芳香性的哌嗪基团,同时在三氮唑基团的侧链中引入叔胺片段以保持化合物的水溶性,此外对GDC-0941的吲唑环进行结构修饰,希望找到可以理想的替代基团。基于以上考虑,我们合成了一系列GDC-0941的类似物(TM1～16)。通过高效液相色谱、核磁共振谱、质谱等分析方法验证了类似物。并进行了体外抗肿瘤活性评价,期望从中筛选出活性优于GDC-0941的新型抗肿瘤候选药物。 www.selleckchem.cn/products/gsk1120212-jtp-74057.html 药理试验结果显示,与GDC-0941相比,大部分类似物显示了较强的抗癌活性,其中活性较好的化合物进行了小鼠体内药物代谢实验,但结果不是很理想,进一步的研究还在继续进行。
背景 GPCR Compound Library 5-FU是临床常用的广谱抗肿瘤药,主要通过干扰肿瘤细胞的DNA合成而杀死肿瘤细胞,但同时也杀伤机体正常细胞,从而引起诸多不良反应,如胃肠道损害、骨髓抑制、神经系统损害等。去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)主要表达于肝细胞表面,可特异识别去唾液酸糖蛋白的半乳糖残基而将其内吞清除。继而的研究发现,某些肿瘤细胞表面,如HepG2、Caco-2、HT-29细胞等,ASGPR高表达,因此,以去唾液酸糖蛋白受体为靶点研究抗肿瘤靶向药物成为目前的研究热点。目前这类药物大多数都是以携带有半乳糖基的载体为递药系统,将抗肿瘤药包裹或吸附,将药物转运到达肿瘤组织而释放,实现靶向抗肿瘤作用。但以化学合成方法,将药物以半乳糖残基修饰,靶向肿瘤组织,提高肿瘤局部浓度,达到肿瘤靶向效果的研究少见。因此,本研究拟采用半乳糖与5-FU共价结合,形成5-FU半乳糖苷,通过研究5-FU半乳糖苷的体内外抗肿瘤作用及其肿瘤靶向性,以期为肿瘤治疗及肿瘤靶向药物研发提供实验依据,用于肿瘤治疗。

方法 采用本实验室设计合成的5-FU半乳糖苷,进行体内、外抗肿瘤及肿瘤靶向研究: 1.体外抗肿瘤及肿瘤靶向研究:选取去唾液酸糖蛋白受体表达量不同的HepG2、Caco-2、A549细胞,采用MTT法观察5-FU及5-FU半乳糖苷对其增殖抑制作用,并计算其IC50值;将Caco-2细胞与5-FU及5-FU半乳糖苷分别孵育后,采用HPLC方法于2、5、10、15、30、60、120分钟检测活细胞内5-FU及5-FU半乳糖苷的摄取情况; 2.体内抗肿瘤及肿瘤靶向研究:采用皮下注射肿瘤细胞悬液的方法,建立HepG2荷瘤小鼠模型,饲养于SPF环境,观察肿瘤生长情况,待肿瘤生长至0.5×0.5 cm左右大小,随机分为模型组、5-FU组(0.2 mM/kg)及5-FU半乳糖苷0.2、0.1和0.05

mM/kg组。尾静脉给药,隔天1次,连续2周。给药治疗期间,观察小鼠一般状态,记录小鼠体重、肿瘤体积变化。停止给药后再连续观察一周。一周后,尾静脉再次给予5-FU及5-FU半乳糖苷,15分钟后收集小鼠静脉血,处死小鼠,分离小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、肠及肿瘤,称重,保存于冰浴。采用血球计数仪检测小鼠血常规;分离血浆,各组织器官匀浆,提取药物,以HPLC方法检测5-FU及5-FU半乳糖苷在血浆、肿瘤及各组织中的分布浓度。 selleck products 结果 1. western blotting结果显示:HepG2、Caco-2细胞有较高水平的去唾液酸糖蛋白受体表达,而A549细胞几乎无去唾液酸糖蛋白受体表达; 2.体外细胞增殖抑制试验表明:5-FU半乳糖苷对HepG2、Caco-2细胞增殖具有明显抑制作用,呈剂量依赖性,且作用较5-FU强;而5-FU半乳糖苷对A549细胞增殖亦有明显抑制作用,呈剂量依赖性,但与5-FU相比无明显差别。其中5-FU的IC50,HepG2:5.95×10-6 M/L,Caco-2:3.17×10-6 M/L,A549:6.24×10-6 M/L; 5-FU半乳糖苷IC50,HepG2:2.75×10-7 M/L,Caco-2:1.75×10-7 M/L,A549:6.05×10-6 M/L。 3.体外细胞靶向结果显示:Caco-2细胞对对5-FU半乳糖苷的摄取量较5-FU明显增多,其摄取量在一定时间内均呈时间依赖性,60 min后细胞摄取量达到饱和。 4.体内抑瘤结果显示:5-FU半乳糖苷可显著抑制裸鼠移植瘤生长,且呈剂量依赖性,同等剂量作用明显强于5-FU;5-FU半乳糖苷对裸鼠体重和血象无明显影响,毒性较小;而5-FU则显著降低裸鼠体重和荷瘤小鼠的血象,毒性较强。 5.体内组织靶向结果显示:末次静脉给药第15分钟后,5-FU半乳糖苷在荷瘤小鼠肿瘤组织的分布浓度较5-FU高。 结论 1.5-FU半乳糖苷对高表达去唾液酸糖蛋白受体的肿瘤细胞生长抑制作用较5-FU显著增强,其可能机制是细胞表面的去唾液酸糖蛋白受体可显著增加其对5-FU半乳糖苷的摄取。 2.与5-FU相比,5-FU半乳糖苷不仅可明显抑制裸鼠移植瘤的生长,且显著降低全身毒性及骨髓毒性,可能机制是含半乳糖基的5-FU半乳糖苷具有较高的肿瘤靶向性。 3.