05),且DXM治疗组较哮喘模型组ERK磷酸化水平有明显下降(P﹤0.05);p38磷酸化水平在哮喘模型组与正常对照组之间无明显变化,但DXM治疗组中p38磷酸化水平较哮喘模型组和正常对照组明显下降(P﹤0.05)。 结论哮喘模型组大鼠支气管肺组织OPN表达及ERK磷酸化水平均有明显增加,表明OPN可能在支气管哮喘发病中起了重要作用,并可能受ERK/MAPK信号转导通路激活而上调。DXM治疗组OPN表达及ERK、p38磷酸化水平均有明显下降,说明DXM有可能通过对ERK/MAPK、p38信号转导通路的双重抑制,下调OPN表达,使支气管肺组织炎症减轻,哮喘得以控制。因此,认为糖皮质激素有效治疗哮喘的原因部分可能是由于OPN表达抑制的作用。
目的 探讨ERK1/2信号通道在大鼠哮喘模型T淋巴细胞IL-13的产生和变化中的免疫调控作用。 方法 以外周血单个核细胞为研究对象,应用ERK信号通道的激动剂EGF和抑制剂PD98059为工具药。将40只SD大鼠随机分为哮喘组和正常对照组,每组20只;取外周血单个核细胞分为5组,分别为:正常对照组,哮喘组,哮喘EGF组,哮喘PD98059+EGF组,哮喘PD98059组。将培养的T淋巴细胞涂片,用免疫细胞化学染色方法检测p-ERK的表达;提取淋巴细胞,用RT-PCR方法检测ERK的mRNA的表达;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中的IL-13蛋白的表达。

Selleck Src 抑制剂 结果 1.与正常对照组淋巴细胞p-ERK蛋白的表达阳性率(3.09%±0.27%)相比,哮喘组淋巴细胞p-ERK的表达阳性率(15.63%±1.04%)显著增高(n=5, p0.05)。 4.与哮喘组淋巴细胞ERK mRNA (0.7119±0.052)相比较,哮喘EGF组淋巴细胞ERKmRNA的表达(0.9606±0.075)显著增高(n=5, p0.05)。 5.与正常对照组淋巴细胞IL-13蛋白的表达量(7.5±1.6)相比,哮喘组淋巴细胞IL-13蛋白的表达量(21.6±3.7)显著增高(n=5, p0.05)。 7. SD大鼠淋巴细胞p-ERK蛋白阳性率与培养液上清IL-13蛋白表达量呈显著性正相关(n=5,r =0.892, p
背景尾加压素II(urotensin II,UII)是继内皮素之后新发现的强力缩血管活性肽,能够促进血管平滑肌细胞、外膜成纤维细胞和心肌成纤维细胞增殖,促进心肌细胞肥大,促进成纤维细胞合成胶原,促进泡沫细胞形成,从而在多种心血管疾病发生和发展过程中发挥重要作用。近年我室研究发现UII尚能诱导血管外膜成纤维细胞迁移,并且骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)参与了该过程。由于骨桥蛋白是参与血管重塑和心肌重塑的重要活性因子,因此,阐明UII和骨桥蛋白表达之间的关系具有重要的意义。

已经 目的研究UII对大鼠主动脉外膜成纤维细胞表达OPN的影响及可能参与的细胞内信号转导通路。 方法取雄性SD大鼠,分离主动脉外膜,剪碎为1mm3大小,采用组织贴块法培养外膜成纤维细胞,实验用3-5代细胞,经无血清DMEM同步化培养24h后进行随机分组实验:(1)对照组:细胞置于无血清DMEM培养基培养;(2)UII刺激组:按照实验设计,分为不同浓度UII刺激组(10- BKM120 10、10-9、10-8、10-7mol/L)和不同时间刺激组,后者将细胞和UII(10-8mol/L)共孵育不同时间(1h,3h,6h,12h,24h);(3)UII+细胞内不同信号通路抑制剂组:培养液中预先加入不同信号阻断剂,如UII受体阻断剂SB710411(10-6mol/L)、钙通道阻断剂nicardipine(10-5mol/L)、PKC抑制剂H7 (10-5 mol/L)、钙调神经磷酸酶抑制剂环孢霉素A(10-5mol/L)、Rho激酶抑制剂Y-27632 (10-5mol/L)或丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)抑制剂PD98059 (10-5mol/L)刺激30min后,再加入UII(10-8 mol/L)共孵育6h或12h,分别收集细胞和培养基,用半定量RT-PCR测定细胞OPN

mRNA表达量;收集培养液,采用ELISA方法检测骨桥蛋白分泌量。 结果UII明显诱导大鼠主动脉外膜成纤维细胞表达OPN。不同浓度UII刺激细胞后,随UII浓度增加,细胞OPN表达量逐渐增加,至10-8 mol/l UII达到高峰。10- 10、10-9、10-8和10-7mol/L UII刺激组OPN mRNA表达分别较对照组增加20.1%(P>0.05)、59.8%(P<0.05)、88.7%(P<0.01)和68.3%(P0.05)、49.8%(P<0.05)、74.9%(P0.05)。UII(10-8 mol/L)刺激细胞后1h、3h、6h和12h OPN mRNA表达分别较对照组提高111.2%(P<0.01)、253.2%(P<0.01)、119.1%(P0.05);10-8 mol/L UII刺激成纤维细胞6h、12h和24h后OPN蛋白分泌量较对照组分别增加59.4%(P<0.05)、74.9%(P0.05)。UII的该作用能够被SB710411、nicardipine、H7、环孢霉素A、Y-27632和PD98059所抑制,OPN mRNA抑制率分别为25.2%、23.7%、20.4%、43.1%、15.6%、29.0%(均为P<0.01),其相应OPN蛋白抑制率分别为29.3%(P< 0.05)、52.7%(P<0.01)、24.7%(P< 0.05)、46. 7%(P<0.01)、38.7%(P<0.01)和39.