0软件进行分析，并用GraphPad Prism5软件进行处理。 结果：1.行为学结果发现SO Aβ1-42处理组较正常对照组，出现明显的认知障碍现象，同时表现出显著的抑郁样行为；而对于学习记忆的影响只有剂量为2mg/kg的SB203580能显著改善SOAβ1-42引起的记忆损伤，对于抑郁样行为剂量为2和4mg/kg SB203580均能显著缓解SO Aβ1-42引起的抑郁样行为，而激动剂PMA却显著阻断了SB203580的作用。2. Western blot法检测海马组织的目标蛋白发现，海马中SO Aβ1-42处理组p-p38MAPK的表达量明显高于正常对照组，而SB203580（2和4mg/kg）能逆转p-p38MAPK的表达上调，而PMA显著阻断SB203580的上述作用；海马中SO Aβ1-42处理组与正常对照组相比，p-CREB和p-Ser9-GSK3β表达显著下调，而SB203580（2及4mg/kg）能显著逆转Aβ1-42对p-CREB和p-Ser9-GSK3β的下调作用，并且PMA显著阻断了SB203580的上述作用；而海马中各组间CREB、p-Tyr279-GSK3α、p-Tyr216-GSK3β和GSK3α/β均无显著性差异；且皮层中上述所有蛋白均未发现有显著的表达差异。 实验二：不同浓度SO Aβ1-42处理海马DG区或CA1区对小鼠认知行为，抑郁样行为及神经肽VGF表达的影响 方法：ICR雄性小鼠选择海马DG或CA1区微注射SO
Aβ1-42（0.5、1μg/side）或对照制作小鼠模型，分为八组：H组[DG区正常对照组]、I组[DG区Aβ42-1处理组]、J组[DG区Aβ1-42（0.5μg/side）]、K组[DG区Aβ1-42（1μg/side）]、L组[CA1区正常对照组]、M组[CA1区Aβ42-1处理组]、N组[CA1区Aβ1-42（0.5μg/side）]和O组[CA1区Aβ1-42（1μg/side）]，12天后开始行为学检测，结束后取各组小鼠海马检测神经肽VGF，蛋白表达量用Odyssey Selleck INK 128 V3.0软件进行分析，并用GraphPad
Prism5软件进行处理。 结果：1. SO Aβ1-42处理海马DG或CA1区得到相似的实验结果，行为学结果显示，在DG或CA1区注射1μg/side SO Aβ1-42均能显著引起小鼠记忆损伤和抑郁样行为，但在强迫游泳和悬尾实验中只有0.5μg/side MAPK抑制剂 SO Aβ1-42处理DG区能显著延长不动时间，而CA1区注射0.5μg/side SO Aβ1-42却未见其显著诱导抑郁样行为。2.各组小鼠海马组织检测神经肽VGF蛋白表达量，结果显示不论是DG还是CA1区，与正常对照组或者逆序列Aβ42-1组相比，低剂量和高剂量的SO Aβ1-42均使其表达量显著下调。 结论： SB203580能够改善SO Aβ1-42诱导的小鼠记忆损伤和抑郁样行为，其作用可能与海马组织中p-p38MAPK、p-CREB和p-Ser9-GSK3β的表达变化有关，p38MAPK/GSK3信号通路在SOAβ1-42诱导的认知障碍与抑郁共患中发挥关键调节作用。其次，我们发现SO Aβ1-42诱导小鼠记忆损伤和抑郁样行为与神经肽VGF表达改变密切相关，提示神经肽VGF可能是一种重要的认知障碍与抑郁样行为的调控靶标，并在AD和抑郁症的发生发展过程中扮演着重要的角色。
背景与目的： 肺癌是目前全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，发病呈逐年上升趋势。作为威胁全世界人类健康的重大疾病，肺癌发病隐匿，早期症状不明显易被忽视，大部分患者在初次诊断时已是晚期，这是目前肺癌疗效不佳的主要原因。作为肿瘤的两大生物学特性，侵袭和转移是导致肿瘤复发以及患者死亡的主要原因之一。而通过对肺癌细胞发生侵袭和迁移的机制的研究，对于控制肺癌的复发和转移有着重要的意义，这也是当今肺癌研究的热点。肿瘤细胞发生侵袭和迁移的过程有多条信号通路参与。其中MAPK信号通路中的一条经典途径——P38MAPK信号通路在肿瘤细胞侵袭和迁移发挥着重要的作用，活化的P38MAPK可以通过调节特定的转录因子的表达和生物活性，实现对肿瘤细胞生物学特性的影响。肿瘤细胞的上皮-间叶转变是指上皮源性肿瘤中的某些细胞在与周围间质相互作用时，丧失其上皮源性，表现为间质细胞特征，也是肿瘤发生侵袭和转移的重要环节，其相关蛋白的表达水平变化与EMT的发生密切相关；EMT发生时，上皮源性肿瘤中的某些细胞在与周围间质相互作用时，丧失其上皮源性，表现为间质细胞特征，是肿瘤发生侵袭和转移的重要原因之一。此外基质金属蛋白酶9因参与基底膜与ECM主要成分IV型胶原的降解，而在肿瘤的侵袭和转移过程中也发挥着重要的作用。研究表明P38MAPK信号通路对肿瘤的复发和转移的影响可分别通过影响EMT相关蛋白的表达或者影响MMP9的活性而实现，但在肺癌中，三者之间的关系尚不明确。为此，本实验将通过抑制P38的活性，观察人肺癌细胞系（H1299、95C）的侵袭和迁移能力的改变，并重点研究其与EMT相关蛋白的表达水平的变化以及MMP9的活性水平和蛋白表达水平的差异，来探讨肺癌中P38参与调节肺癌的侵袭和转移能力的可能的机制。
那个 方法： 通过两种P38抑制剂：SB203580和SB239063抑制P38的活性水平。通过划痕实验和Transwell实验的方法，观察抑制P38的活性水平对两种人肺癌细胞H1299和95C的侵袭和迁移能力的影响；通过明胶酶谱实验来检测抑制P38活性水平对MMP9的活性的影响；并通过Western-blot的方法来观察抑制P38的活性水平对EMT相关蛋白和MMP9蛋白的表达水平的影响。 结果： 实验结果表明，在H1299细胞和95C细胞两种细胞系中使用浓度为10μM的P38抑制剂SB203580和SB239063，可以明显抑制两种细胞的P38的磷酸化水平；划痕实验和无胶的Transwell实验结果表明，抑制P38的活性使得H1299细胞和95C细胞的迁移能力明显下降；铺胶的Transwell实验结果显示，抑制P38的活性对H1299细胞和95C细胞的侵袭能力没有明显的影响；明胶酶谱实验和Western-blot实验的结果表明抑制P38的活性对MMP9的活性以及蛋白的表达水平也没有显著的影响；Western-blot实验的结果表明，抑制P38的活性对使得H1299细胞中EMT相关蛋白β-catenin，和Vimentin的表达水平明显降低，snail蛋白的表达水平无明显变化；95C细胞中EMT相关蛋白β-catenin的表达水平明显降低，而Vimentin和snail蛋白的表达水平没有发生明显变化。 结论： 1.两种P38抑制剂SB203580和SB239063通过抑制P38的磷酸化水平抑制了P38的蛋白的活性；2.抑制P38的活性可以使得人肺癌细胞H1299和95C的迁移能力下降，而对侵袭能力无明显影响；3.