指纹图谱研究 采用高效液相色谱法建立了12种饮片的指纹图谱。白芍、炒白芍、酒白芍、土白芍、赤芍饮片的指纹图谱中各标定了5、7、6、5、9个特征峰；川芎、酒川芎的指纹图谱中标定了15个特征峰,在当归、酒当归的指纹图谱中标定了6个特征峰；黄芪、炙黄芪饮片中标定了12个特征峰；党参指纹图谱中标定了5个特征峰。其中白芍、川芎、当归均以对照药材为特征指纹图谱,采用中药指纹图谱相似度评价软件建立了炒白芍、酒白芍、土白芍、赤芍、酒川芎、酒当归、黄芪、炙黄芪、党参的特征指纹图谱。 采用高效液相色谱与质谱连用技术,对白芍、赤芍、川芎、当归、黄芪、党参饮片中部分色谱峰进行了指认。其中对白芍、赤芍中12个化学成分进行了指认,对川芎、当归中13个化学成分进行了指认,对黄芪中11个化学成分进行了指认,对党参中4个化学成分进行了指认。 3.含量测定研究 同时建立了白芍、炒白芍、酒白芍、土白芍、赤芍五种饮片中没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、五没食子酰葡萄糖含量测定的方法；以阿魏酸为内标,建立同时测定川芎、酒川芎、当归、酒当归四种饮片中阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、藁本内酯4个化学成分含量的方法；建立了高效液相色谱-紫外检测-蒸发光散色检测联用(HPLC-UV-ELSD)测定黄芪、炙黄芪两种饮片中7-O-毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷含量的方法；建立了党参中党参炔苷含量测定的方法。所建立的12种饮片的含量测定方法精密度、稳定性、重复性、准确度良好,可作为这12种饮片的质量控制方法。

4.水煎出物与醇提取物差异性研究 临床上汤药的使用以及中成药生产过程中,中药饮片多采用水煎方法进行提取,其煎出物的化学成分与用有机溶剂提取的化学物质具有一定的差异性。本文对上述十二种中药饮片的水煎出物与醇提取物进行了差异性研究,以期为临床汤药的使用、中成药生产工艺研究,以及药理毒理研究提供参考。研究结果表明：白芍饮片及其炮制品、赤芍饮片水煮后,其中没食子酸含量升高,儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷含量无明显变化,五没食子酰葡萄糖含量下降；川芎、酒川芎、当归、酒当归水煮后阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ含量无明显变化、洋川芎内酯A、藁本内酯含量明显下降；黄芪、炙黄芪水煮后7-O-毛蕊异黄酮葡萄糖苷等化学成分含量均明显下降；党参水煮后化学成分发生了很大变化,而党参炔苷含量有所下降。
目的：通过应用四氯化碳(CCl4)复合法复制大鼠肝纤维化模型。在疏肝健脾活血法的指导下,运用经方柴胡桂枝汤对肝纤维化模型大鼠进行治疗,并研究此方药对纤维化肝脏中纤维连接蛋白(FN)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及血清中层粘连蛋白(LN)和透明质酸酶(HA)表达的影响。 INK 128体外 也许 方法：选取60只Wistar健康雄性大鼠,随机分为6组,分笼饲养,每组10只(分组情况：空白组、模型组、西药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组)。造模采用CCl4复合法,两周后使用柴胡桂枝汤对中药治疗组大鼠进行灌胃,使用秋水仙碱对西药对照组大鼠进行灌胃。大鼠于8周后处死,取肝取血。采用免疫组化方法检测纤维化肝脏中FN、α-SMA表达情况,采用放射性免疫法检测大鼠血清中LN、HA的含量。

结果：模型组大鼠肝脏组织中FN、α-SMA表达明显增高,其中中药中剂量组与除空白组外其他各组表达情况相比,均具有显著性差异(P<0.01)；模型组大鼠血清中LN、HA含量明显增高,其中中药中剂量组与除空白组外其他各组含量相比,均具有显著性差异(P
目的：丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus, HCV）为单股正链RNA病毒，全长为9.6kb。目前全世界近3%的人口为HCV感染者，其中50-80%以上的患者由急性转为慢性持续感染，甚至发展为肝硬化、肝细胞癌。研究发现固有免疫系统和获得性免疫系统均参与了HCV感染、清除及慢性化过程，但其确切机制尚不十分清楚。TIPE2（Tumor necrosis factor-α-inducedprotein8-like2, TNFAIP8L2），即肿瘤坏死因子α诱导蛋白8型-2，是新近发现的一种免疫信号转导通路重要调节器。TIPE2是先天性免疫及获得性免疫的负性调节者，在炎症性疾病中发挥重要作用，也通过作用于Ras信号通路提供从炎症到肿瘤的分子桥梁。先前的研究表明TIPE2不仅高表达于免疫细胞和组织，如淋巴结、淋巴细胞和单核细胞等，也表达于其他非免疫细胞，如腺上皮细胞、分层或假复层上皮细胞及肝细胞、神经元细胞、软骨细胞等。而且对人TIPE2特性的研究表明TIPE2可能参与多种疾病的发生发展，如系统性红斑狼疮、糖尿病肾病、慢性乙型肝炎、肝癌、肾癌等，但具体机制尚不清楚。Luan等应用蛋白印迹法（Western

blot）和RT-PCR检测发现，从BALB/C小鼠脾脏分离提取的CD4+CD25+Treg细胞（简称Treg细胞）中可以检测到TIPE2的表达，且能增强Treg细胞的免疫抑制作用，提示TIPE2基因可能与Treg细胞介导的免疫调控机制有关，但是其具体机制尚不十分清楚。Treg细胞是一群具有免疫抑制作用的T细胞亚群，在感染、肿瘤免疫和移植中发挥了重要作用。据报道，Treg细胞可分泌免疫抑制因子从而直接抑制效应性T细胞的功能。在很多肿瘤疾病中，Treg细胞的广泛浸润提示着预后差、生存率低。人叉头样转录因子p3（forkhead/winged selleck产品 helix transcription factor p3, FOXP3）基因是转录因子forkhead/winged-helix家族成员之一，已被广泛认可是Treg细胞的特异性标记物，是调控Treg细胞发育、分化及成熟的关键转录因子。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associatedantigen4, CTLA-4）是T细胞活化的负性调节子，是Treg细胞的细胞表面分子，对T细胞活化有着抑制作用。鉴于免疫系统内TIPE2基因的正常表达可以有效的防止机体过度反应和维持免疫稳态，我们推测TIPE2基因和FOXP3、CTLA-4在慢性丙型肝炎发病机制中具有某种关联性。 因此，本课题的主要目的是通过检测TIPE2基因及FOXP3、CTLA-4在慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclearcells, PBMCs）中的表达情况，一方面了解慢性丙型肝炎患者PBMCs中TIPE2基因表达情况，另一方面探讨TIPE2和FOXP3、CTLA-4在慢性丙型肝炎发病机制及进展中的作用，为进一步阐明TIPE2在慢性丙型肝炎发生和发展中的调控作用奠定基础。 方法： 1病例选择 慢性丙型肝炎患者60例，男31例，女29例，平均年龄49.40±14.