5mg/kg, Sham组及IR组均在相同时间点给予等量生理盐水处理,直至处死。 采用苏木素-伊红(HE)染色检测缺血再灌注48h脑组织病理学改变;TUNEL细胞凋亡原位检测技术检测缺血再灌注后梗死侧皮质48h凋亡的神经细胞以评价缺血再灌注对神经细胞的损伤情况以及米诺环素的神经保护作用；SP免疫组化染色方法检测IKBα、NF-κB MK1775 P65、TNF-α蛋白的表达,观察各时间点的变化情况和应用米诺环素治疗的影响。 结果 (1)再灌注后48h MT组海马CA1区组织病理改变较IR组明显减轻； (2)再灌注后48hIR组与Sham组相比TUNEL阳性细胞数显著增多(P<0.01),MT组与IR组相比,TUNEL阳性细胞数明显减少(P<0.01)；与同时间点IR组相比,MT组海马CA1区NF-κBP65、TNF-α阳性细胞数明显减少(P<0.01),较IR组明显增高(P
目的：构建含有目的基因IL-24的真核表达质粒pEGFP-N1-IL-24,将其转染小鼠黑色素瘤B16细胞,研究IL-24在细胞内表达对肿瘤细胞的凋亡和体外增殖的影响。 方法：将pUC57-IL-24用限制性核酸内切酶双酶切后,经琼脂糖凝胶电泳回收、纯化,与pEGFP-N1相连接,将连接产物转化至感受态细胞E.coli
DH5a中,提取质粒,再次酶切电泳,检查IL-24插入pEGFP-N1的准确性,并进行测序验证。用脂质体法将pEGFP-N1-IL-24转染B16细胞(B16/pEGFP-N1-IL-24组),同时设未处理的B16细胞(B16组)作对照组,另外将只加入脂质体的B16细胞(B16/Lip组)作脂质体组,pEGFP-N1转染的B16细胞(B16/pEGFP-N1组)作空载体组,加入长春新碱的B16细胞(B16/VCR组)作化疗药组,24h后在荧光显微镜下观察各组细胞的表达,于转染48h后在倒置显微镜高倍镜下观察细胞的形态学变化,用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)法检测细胞凋亡,用MTT法检测B16细胞的体外增殖能力,实验结果用x±s表示,用统计软件做t检验,P<0.05,P
目的: 研究九节龙皂苷Ⅰ(ardipusilloside I,ADS I)对口腔粘液表皮样癌高转移细胞株Mc3的增殖、凋亡及细胞周期的影响,初步探讨ADS I可能的抗肿瘤作用机制 方法:以不同浓度的ADS I作用于口腔粘液表皮样癌Mc3细胞,采用MTT法观察ADS I对口腔粘液表皮样癌Mc3细胞增殖的影响;采用Hoechest 33342染色法和透射电镜(TEM)观察细胞形态学的变化;采用AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡情况;采用流式细胞术PI单色标记法检测Mc3细胞周期的改变;采用DNA琼脂糖凝胶电泳法检测凋亡特异性梯状DNA;采用免疫组化法检测抗凋亡蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白caspase-3表达的变化。
结果:ADS I作用于Mc3细胞后,小剂量对细胞杀伤作用较轻,随着药物浓度的增加, ADS I能显著抑制Mc3细胞增殖而且呈明显的浓度、时间依赖关系,作用于Mc3细胞48h的IC50值为9.98ug/ml。Hoechest 33342染色法和透射电镜观察到细胞形态学上的变化,包括细胞皱缩,微绒毛消失,染色质固缩集聚至核膜周边呈新月形。流式细胞仪检测未经药物作用的细胞凋亡率为11.63±0.16%,2.5、5、10ug/ml ADS I作用24后的凋亡率为15.57±0.07%,25.63±0.18%,86.27±0.04%;细胞周期阻滞在S期;琼脂糖凝胶电泳结果显示,10ug/ml PR-171化学结构 ADS I作用于Mc3细胞24后,可见凋亡细胞典型的梯状DNA条带,Western blotting结果显示,caspase-3和Bax蛋白表达量增高,Bcl-2蛋白表达量降低。
selleck ROCK 抑制剂 结论: 1. ADS I具有抑制口腔粘液表皮癌细胞增殖,阻滞细胞周期进程的作用,其抑制作用呈浓度时间依赖性。 2. ADS I有诱导Mc3细胞凋亡作用。 3. ADS I诱导细胞凋亡作用可能是通过引起细胞DNA受损,上调caspase-3和Bax蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达而达到的。
目的：本研究检测胰腺癌中胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells, PSCs)的活化与血小板源生长因子-B (platelet derived growth factor B, PDGF-B)、肾上腺髓质素(adrenomedullin, AM)的表达及相关性和其与临床病理因素之间的关系,探讨PSCs在胰腺癌的发生、发展及转移中的作用。 方法：1)收集天津医科大学总医院普外科2004年至2010年手术切除的胰腺癌石蜡包埋标本43例,并选取36例胰腺癌癌旁切缘组织作为对照。2)应用免疫组织化学染色SABC法分别检测胰腺病理标本中α-SMA(PSCs活化的标志物)、PDGF-B、AM的表达以及微血管密度(Microvessel densit, MVD)的测定,分析α-SMA、PDGF-B及AM的表达与临床病理因素之间的关系和α-SMA与PDGF-B、AM表达的相关性以及PDGF-B、AM与MVD的相关性。 结果： 1.43例胰腺癌标本中α-SMA、PDGF-B和AM的表达明显高于36例癌旁组织标本,两组之间比较有显著性差异(P
背景及目的 胶质瘤是颅内最常见的原发性恶性肿瘤,约占成人中枢神经系统肿瘤的50%-60%,成人中发病率为每年8/10万,胶质瘤患者的预后不佳。由于胶质瘤恶性度高,呈侵袭性生长,导致手术难以全切,术后复发率、死亡率较高。 胶质瘤的发生与体内多种癌基因和抑癌基因异常有关,但胶质瘤中相关癌基因和抑癌基因的变化还没有完全清楚,癌基因和抑癌基因之间的复杂关系需要进一步阐明。 第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(Phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten, PTEN)是近年发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,在调节细胞的增殖、迁移、粘附等方面发挥重要作用。 丝裂原活化蛋白激酶(]mitogen-aetivatedproteinkinase, MAPK)参与细胞的生长、发育、分裂、凋亡,以及细胞间的功能同步等多种过程。 本实验的目的是研究PTEN与p38MAPK在人脑胶质瘤瘤中的表达情况,与胶质瘤病理级别之间的关系及其相关性,从而进一步阐明胶质细胞瘤侵袭性的分子机制,为其诊疗提供理论依据。 方法 研究对象为郑州大学第一附属医院神经外科2008年5月至2010年10月期间的胶质瘤手术切除且保存完好的石蜡包埋标本64例,其中男性33例,女性31例,患者年龄9-82岁,平均45.