样品4次冻融,以及在提取后,4℃下12h内稳定性良好。结论该法灵敏、快速、准确,操作简便、线性范围宽,可用于他莫昔芬的药动学研究及常规治疗药物监测。”
“目的:通过腺病毒介导,研究磷脂酰肌醇3-激酶p55γ调节亚基N末端24个氨基酸的过表达对胃癌MGC803细胞生长增殖的影响。方法:在HEK293细胞中扩增重组腺病毒Ad-N24-GFP以及空载体病毒Ad-GFP,并进行病更多毒滴度以及腺病毒对胃癌细胞感染率的测定,免疫印迹方法鉴定重组腺病毒感染MGC803细胞后融合蛋白N24-GFP的表达。通过细胞生长曲线和克隆形成实验观察Ad-N24-GFP对细胞增殖的影响。结果:重组腺病毒经过感染HEK293细胞后大量扩增,病毒滴度测定为1.0×1010pfu/ml,重组腺病毒对MGC803细胞的感染率在感染复数(MOI)为100激酶抑制剂分子库时最强。与空载体细胞相比较,N24-GFP的高表达明显抑制MGC803细胞的生长,且抑制程度随病毒感染复数的增加呈逐渐增强的趋势;感染Ad-N24-GFP组细胞的克隆形成率[(28.30±3.25)%]明显低于对照组细胞[(42.16±2.84)%,P<0.05]。结论:腺病毒介导N24p55γ基因的过表达能抑制胃癌细胞MGC803的增殖,其在胃癌PI3K抑制剂基因治疗上可能具有潜在的应用前景。”
“目的:检测活动期皮肌炎(DM)患者外周血CD4+T细胞转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素10(IL-10)的表达以及血清肌酸激酶(CK)含量。初步探讨CD4+T细胞TGF-β1、IL-10在DM发病机制中的作用。方法:收集15例活动期DM患者和15例健康对照者外周血,采用免疫磁珠分离获得CD4+T细胞,通过逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测出各组TGF-β1、IL-10表达水平。