第二章 NLRP3炎性小体活化及细胞焦亡在大鼠根性神经痛模型中的作用研究目的在NCLDH模型中,探究NLRP3炎性小体及其介导的细胞焦亡在大鼠根性神经痛中的作用及影响。研究方法1.分组及建模将SD大鼠(雄性)随机分为sham组、vehicle组、VX-765组(模型+VX-765),建立NCLDH模型,术后1-3d VX-765组连续腹腔Copanlisib注射VX-765(50mg/kg),其他各组腹腔注射等剂量的二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMS0)溶剂。2.动物疼痛行为评估分别于术前Id及术后1-7d观察并记录大鼠术侧50%PWT 和 PWL。3.术后第7d取术侧腰膨大处脊髓背角组织,采用qRT-PCR(quantitative Realwww.selleck.cn/products/ulixertinib-bvd-523-vrt752271.html-Time PCR)和Western blot技术检测各组大鼠术侧脊髓背角组织中NLRP3炎性小体和细胞焦亡各组分蛋白(NLRP3、Caspase-1、ASC及GSDMD)的mRNA及蛋白表达水平。应用免疫组化技术(Immunohistochemistry,IHC)测定各组获取的脊髓背角中Caspase-1和NLselleck Ferroptosis 抑制剂RP3蛋白的阳性细胞表达量。应用免疫荧光双染技术(Immunofluorescence,IF)检测各组获取的脊髓背角中细胞焦亡的情况。应用ELISA法测定各组获取的脊髓背角IL-1 β、IL-18的表达水平。研究结果1.术后1-7d,vehicle组中,大鼠术侧PWL及50%PWT较sham组均显著降低;自术后第2d始,VX-765组大鼠术侧PWL及50%PWT较vehicle组均显著升高。