该研究旨在探讨异硫氰酸苯乙酯(PEITC)抑制人非小细胞肺癌细胞表达c-Myc和RPS19的分子机制。首先体外培养A549、H35

该研究旨在探讨异硫氰酸苯乙酯(PEITC)抑制人非小细胞肺癌细胞表达c-Myc和RPS19的分子机制。首先体外培养A549、H358和H1299细胞系,Western blot、qPCR检测细胞内核糖体蛋白S19(RPS19)和c-Myc的表达水平。10、30和50 μmol/L PEITC处理细胞后,Western blLGK-974ot检测细胞内RPS19、c-Myc、E-cadherin、Vimentin的表达水平以及PI3K/Akt、mTOR和S6K的磷酸化情况,并通过构建pGL4.10-RPS19荧光报告基因载体检测RPS19启动子报告基因活性。随后采用c-Myc、PI3K/Akt以及mTOR抑制剂处理细胞,分析细胞内RPS19、c-M以及yc表达变化。随后细胞内转染pcDNA3-cMyc-HA质粒过表达c-Myc,观察其对细胞内RPS19表达的影响,并采用siRNA沉默RPS19表达,检测细胞内EMT相关分子E-cadherin、Vimentin表达以及细胞侵袭、迁移的变化。Western blot以及qPCR结果显示,A549和H1299细胞系中RPS19和c-Myc的表达水平均显著高于MRC-5细胞。采用不同浓度PEITC处理细胞后,细胞内RPS19、c-Myc以及Vimentin表达水平显著降低,E-cadherin表达增高,PI3K/Akt、mTOR和S6K磷酸化水平减弱。PI3K/Ak、mTOR抑制剂均可显著降低细胞内RPS19和c-Myc表达。此外,c-Myc抑制剂也能够显著降低细胞内RPS19表达以及启动子报告基因活性。

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