05),但25μmol/L～200μmol.LNaHS能提高PC12细胞的存活率(P0.05)；③多奈哌齐能降低Aβ25-35引起的细胞毒性作用,提高PC12细胞存活率(P0.05)；②不同浓度NaHS和多奈哌齐均可降低Aβ40, Aβ42和sAPPβ蛋白表达水平,还可增高sAPPα蛋白表达水平,这种作用与H2S浓度有相关性。结论：外源性H2S和多奈哌齐可以诱导APP/Aβ代谢途径向非淀粉样途径(α途径)转变,H2S的这种作用具有浓度依赖性。 AG-014699 价格 第三部分外源性硫化氢和多奈哌齐对PC12细胞α分泌酶(ADAM10/ADAM17)的影响 目的：观察H2S和多奈哌齐对PC12细胞α-分泌酶ADAM10和ADAM10蛋白的影响,探讨二者对APP代谢途径的转变作用是否与ADAM10和ADAM17相关。方法：以PC12细胞为研究对象,用NaHS作外源性H2S供体,实验设空白对照组、NaHS10、25、50、100和200μmol/L组、多奈哌齐20μmol/L组,共7组。按分组浓度分别处理PC12细胞24h后,用Western

blot检测代谢过程中关键蛋白ADAM10和ADAM17的表达水平。结果：不同浓度NaHS和多奈哌齐组的ADAM10和ADAM17蛋白表达水平较对照组增高,且随着NaHS浓度增加,蛋白表达水平呈递增趋势(P0.05),但100μmol/LNaHS组的ADAM10及ADAM17蛋白表达水平最高(P0.05),而SP组、LY组ADAM10和ADAM17的蛋白表达降低。②SB组Aβ40、Aβ42、sAPPβ和sAPPα蛋白表达与对照组比较无显著变化(P>0.05)。LY组、SP组Aβ40、Aβ42和sAPPβ蛋白表达显著增强,并降低sAPPα蛋白的表达,与对照组比较具有显著差异性(P<0.01)。③SP组、LY组H2S增强ADAM10蛋白表达的作用降低,H2S降低Aβ40、Aβ42和sAPPβ蛋白表达的作用减弱,与对照组比较具有显著差异(P<0.01)；SB组、SP组、LY组多奈哌齐增强ADAM10、ADAM17蛋白表达的作用均降低,多奈哌齐降低Aβ40、Aβ42和sAPPβ蛋白表达的作用减弱,与对照组比较具有显著差异(P<0.01)。④SP组、LY组可抑制H2S升高sAPPα蛋白的表达,与对照组比较具有显著差异(P<0.01)；SB组、SP组、LY组可抑制多奈哌齐升高sAPPα蛋白的表达,与对照组比较具有显著差异(P
从中草药、植物中寻找有效且毒副反应小的抗肿瘤药物俨然已成为新世纪国内外学者研发抗癌药物的新方向。香芹酚已证实具有多方面的药理作用，且对人的正常细胞毒性较小。已有多项实验研究表明香芹酚能抑制多种肿瘤细胞的生长，但对人肝细胞肝癌的抑制作用及其机制尚未见报道。

这个 PLX4032细胞系 目的： 研究香芹酚对肝癌HepG-2细胞增殖及凋亡的影响，并初步探讨其可能的分子机制。 方法： 体外培养肝癌HepG-2细胞及肝细胞LO-2，分别以不同浓度的香芹酚作用24h，MTT法检测香芹酚的的抗增殖效应，Hoechst33258染色法及流式细胞术分析香芹酚诱导肝癌HepG-2细胞凋亡作用，Western Blot法分析香芹酚对肝癌HepG-2细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3及PARP表达的影响以及MAPK家族蛋白的各种磷酸化形式。最后，分别使用P38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580阻断P38MAPK信号通路和ERK/MAPK信号通路特异性阻断剂U0216阻断ERKMAPK信号，通过MTT法及Hoechst33258染色法检测其阻断后肝癌HepG-2细胞的增殖及凋亡变化。 结果： 香芹酚对人肝癌HepG-2细胞的抗增殖效应表现出剂量依赖性，随着香芹酚浓度的增加，细胞存活率逐渐下降，香芹酚对肝癌HepG-2细胞24h作用时的IC50浓度为0.32mM，而同样条件下香芹酚对肝细胞LO-2细胞表现出低毒性。Hoechst33258核染色及流式细胞术的结果显示香芹酚诱导了肝癌HepG-2细胞的凋亡，Hoechst33258核染色的结果显示随着香芹酚浓度的增加(0、0.05、0.1、0.2、0.4mM)，HepG-2细胞呈现出明显的凋亡形态改变；流式细胞仪检测的细胞凋亡比率明显升高，随着浓度的升高其凋亡率依次为：3.70±0.22%、13.50±1.59%、25.80±2.18%、30.50±0.25%、50.60±3.81%。Western

Blot结果发现香芹酚处理肝癌HepG-2细胞24h后，Bcl-2蛋白的表达明显减弱，且呈浓度依赖性；当香芹酚浓度在0.2mM以上时出现caspase-3的激活及cleaved PARP片断，亦呈浓度依赖性，说明香芹酚诱导肝癌HepG-2细胞凋亡与线粒体途径相关。予以相同浓度的香芹酚处理肝癌HepG-2细胞15min后，Western Blot结果发现磷酸化ERKMAPK蛋白的表达逐渐下降；磷酸化P38MAPK亦被激活，但其蛋白表达随浓度变化无明显趋势；而JNK磷酸化未被激活。在阻断ERKMAPK信号转导通路后，香芹酚对肝癌HepG-2细胞抗增殖效应增强而诱导凋亡效应无变化；阻断p38MAPK信号转导通路后，香芹酚对肝癌HepG-2细胞诱导凋亡作用减弱，同时抗增殖效应减弱。 结论： 1.香芹酚具有以剂量依赖性方式抗肝癌HepG-2细胞的效应； 2.抗肝癌HepG-2细胞的效应是通过抑制增殖及诱导凋亡； 3.