采用ELISA试剂盒测定血清中CK、CK-MB、LDH、MDA及SOD含量变化。 4.采用Westenblot蛋白印迹法检测反复力竭大鼠左室心肌ERK、JNK及P38磷酸化水平。结果: 1.反复力竭游泳后大鼠血清中CK含量(ng/ml)比较:Sal-REE组(35.88±3.66)、RES组(40.61±1.80)与Control组(27.99±2.27)相比较显著升高(P<0.05);Sal-RES组与RES组相比升高更加显著(P<0.05);Sal组(27.91±1.91)与Control组相比较无明显统计学差异(P>0.05)。 2.反复力竭游泳后大鼠血清中CK-MB含量(ng/ml)比较:Sal-REE组(13.03±0.42)、RES组(14.14±0.78)与Control组(12.10±0.47)相比较显著升高(P<0.05);Sal-RES组与RES组相比升高更加显著(P<0.05);Sal组(12.23±0.63)与Control组相比较无明显统计学差异(P>0.05)。
3.反复力竭游泳后大鼠血清中LDH含量(U/L)比较:Sal-REE组(4.21±0.64)、RES组(3.31±0.66)与Control组相比较显著升高(P<0.05);Sal-RES组与RES组相比升高更加显著(P<0.05);Sal组(3.45±0.72)与Control组相比较无明显统计学差异(P>0.05)。 4.基础状态下,Control和Sal组LVDP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax无明显统计学差异(P>0.05);Sal-RES组和RES组分别与Control组相比,LVDP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax明显降低(P<0.05),且RES组与Sal-RES相比明显降低(P<0.05)。 寻找更多 I/R以后,复灌后60min时,LVDP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax恢复率Control组分别为79.15%、65.56%、66.86%;Sal组分别为78.97%、65.61%、71.84%;Sal-RES组分别为76.52%、44.35%、47.33%;RES组分别为53.22%、42.01%、31.91%。Control组和Sal组相比恢复率无明显差异(P>0.05),Sal-RES组和RES组较Control组明显下降(P<0.05),且RES组与Sal-RES组明显下降(P<0.05)。 5.反复力竭游泳后大鼠血清中MDA含量(mmol/ml)比较:Sal-REE组(3.18±0.35)、RES组(3.65±0.25)与Control组(2.77±0.13)相比较显著升高(P<0.05);Sal-RES组与RES组相比升高更加显著(P<0.05);Sal组(2.84±0.31)与Control组相比较无明显统计学差异(P>0.05)。 Gefitinib细胞系 6.反复力竭游泳后大鼠血清中SOD含量(ng/ml)比较:Sal-REE组(7.56±1.00)、RES组(6.26±1.39)与Control组(9.17±0.57)相比较显著降低(P<0.05);RES组与Sal-RES组相比降低更加显著(P<0.05);Sal组(9.28±0.42)与Control组相比较无明显统计学差异(P>0.05)。
7.反复力竭游泳后,p-ERK/ERK灰度值比值Sal-REE组(1.968±0.078)、RES组(0.633±0.087)与Control组(0.202±0.037)相比较有显著升高(P<0.05);Sal-RES组与RES组相比升高更加显著(P<0.05);Sal组(0.230±0.047)与Control组(0.202±0.037)相比较无明显统计学差异(P>0.05)。 p-JNK/JNK灰度值比值RES组(1.087±0.068)与Control组(0.102±0.037)、Sal组(0.130±0.036)、Sal-REE组(0.133±0.077)相比较均有显著升高(P<0.05);其余三组相比较无明显统计学差异(P>0.05)。 p-P38/P38灰度值比值RES组(2.823±0.091)与Control组(0.087±0.041)、Sal组(0.179±0.074)、Sal-REE组(0.174±0.070)相比较均有显著升高(P<0.05);其余三组相比较无明显统计学差异(P>0.05)结论:
1.红景天苷能够显著抑制反复力竭后大鼠血清中CK、CK-MB、LDH含量的升高,这表明红景天苷能够抑制反复力竭对大鼠心肌细胞的损伤。 2.红景天苷对反复力竭游泳大鼠具有较好的心脏保护作用,可以有效抑制缺血/再灌注所致的血流动力学改变和心功能损伤,提高离体心脏的抗缺血/再灌注能力。 3.反复力竭运动可以显著升高大鼠血清MDA含量,降低SOD含量,说明力竭性运功可能通过抗氧化应激机制造成大鼠心肌损伤及功能的下降,红景天苷的保护作用可能通过抗氧化机制发挥作用 LBH589体内 4.反复力竭运动作为应激刺激,可以显著升高ERK、JNK、P38三种激酶的磷酸化水平,表明力竭性运动可能通过MAPKS信号通路机制对大鼠心脏结构及功能造成损伤,红景天苷干预可通过升高ERK、降低JNK、P38磷酸化水平对力竭性心脏损伤起到保护作用。
薤白为百合科植物小根蒜Allium chinense GDon或Allium macrostemon Bge.干燥鳞茎,广泛分布于我国东北和华北等地,临床用于治疗心绞痛、心率不齐及腹泻等。薤白乙醇提取物中主要为皂苷类成分,具有抑制血小板聚集,降脂及抗癌等活性。 为了进一步明确薤白中皂苷类化学成分的物质基础,寻找薤白皂苷类化合物中的活性成分,本文在以下方面开展了一系列探索,主要研究成果如下: 1.对薤白皂苷类成分进行了分离和鉴定,运用UV、IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HSQC、HMBC和NOESY等分析手段鉴定了其中25个成分的结构,包括1个黄酮类化合物、1个木脂素类化合物、17个已知皂苷类化合物和6个新的皂苷类化合物。 2.采用HPLC-ELSD技术建立了薤白药材甾体皂苷类成分的指纹图谱,发现其图谱中有18个共有特征峰,对12个共有峰进行了指认。采用该方法分析了来源于多个产地的11批薤白药材,并进行了相似度评价和主成分分析,为薤白皂苷类提取物质量控制提供了新方法。 3.