近年来,对纳豆激酶的分子生物学、生理生化特性、发酵条件优化、分离纯化以及产品开发等方面进行了大量的研究。与其他传统溶栓剂相比,纳豆激酶具有安全性好、成本低、易被人体吸收、作用直接迅速、作用持续时间长等优点,因此极有可能开发为新一代的溶栓剂。”
“背景与目的 TLE1是参与Wnt、Notch以及EGFR信号通Selleckchem GSK1120212路调控的一种重要蛋白。TLE1N端Q结构域片段通过介导自身寡聚化及与LEF1结合发挥调控作用。本实验旨在构建人TLE1N端Q区基因在大肠杆菌的融合表达载体,制备并纯化人TLE1N端Q结构域蛋白片段,制备TLE1Q结构域多克隆抗体。方法以人肺腺癌cDNA库为模板聚合酶链反应(polym一般erase chain reaction,PCR)特异性扩增TLE1-Q(1-136)基因序列,与pGEX-4T-1质粒连接后转化感受态大肠杆菌E.coli。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D thiogalactoside,IPTG)诱导表达产生融合蛋白GSINCB018424生产商T-TLE1-Q(1-136)。经亲和层析,rombin酶切,FPLC纯化,SDS-PAGE鉴定目的蛋白TLE1-Q(1-136)。免疫家兔,制备多克隆抗体。结果测序证实重组表达质粒中的人TLE1N端Q结构域基因序列正确,成功构建表达型重组质粒pGEX-4T1-TLE1-Q。重组质粒转化大肠杆菌C+后,经诱导,重组蛋白GST-TLE1-Q(1-136)得到表达。