但目前,关于骨重建中成骨与破骨细胞间信号传递的深层机制还不清楚。目的:利用transwell技术,在体外建立一种成骨与破骨细胞的新型共育体系,为深入研究骨重建中成骨与破骨细胞的相互作用提供成熟的实验模型。方法:采用MC3T3-E1成骨样细胞株与RAW264.或7破骨前体细胞株,进行体外成骨与破骨细胞的诱导分化,并利用Transwell共培养板(0.4μm聚酯膜)建立成骨与破骨细胞的共育体系。共培养6d后,通过测定细胞活性和碱性磷酸酶(ALP)活力分析成骨细胞的增殖和分化活性,利用抗酒石酸Alectinib酸性磷酸酶(TRAP)染色、甲苯胺蓝(TB)染色、TRAP活性测定及扫描电镜技术观察破骨细胞的分化及骨吸收功能。结果与结论:共培养体系中成骨样细胞的无限增殖能力减弱,而分化活性明显增强,同时破骨前体细胞被诱导分化为成熟的破骨细胞,并无具有一定的骨吸收功能。因此,该共培养体系可用于骨重建中成骨与破骨细胞间信号通路的深层研究。”
“目的:探究沉默Notch1基因对人乳腺癌MCF-7细胞JNK1和p53磷酸化的影响。方法:选取人乳腺癌MCF-7细胞作为研究对象,构建shRNA-Notch1真核表达质粒用于转染MCF-7细胞使Notch1基因沉默。