10、通过转染 miRNA-543 mimic、miRNA-543 inhibitor 以及 miRNA-543 inhibitor+SPOP siRNA后,观察细胞迁移和侵袭情况。11、通过 Western blot 检测转染了 miRNA-543 mimic、miRNA-543 inhibitor 后的MKNTideglusib IC5045和AGS细胞中SPOP、E-cadherin及vimentin蛋白的表达水平,说明EMT在此过程中起到的作用。研究结果1、成功培养并分离出的悬浮球体细胞,随着时间的推移,球体细胞逐渐增多,球体不断增大。2、分别使用免疫荧光、Western blot分析悬浮球体细胞与贴壁细胞干细胞标记并且物CD44、Sox2和Oct3/4的表达差异。发现悬浮球体细胞具有肿瘤干细胞特性,并且其成球能力、干细胞标志物的表达等均比贴壁细胞显著增高,致瘤能力也较贴壁细胞显著增强。3、分别使用Western blot及实时定量PCR对胃癌及癌旁正常组织SPOP的表达进行检测,结果显示,胃癌组织SP寻找更多OP蛋白、SPOP mRNA表达水平显著低于其对应癌旁组织,起到抑癌基因的作用。4、分析60例胃癌组织SPOP表达与临床病理特征的关系,发现胃癌组织SPOP的表达与肿瘤TNM分期(P=0.038)、分化程度(P=0.029)、浸润深度(P=0.009)、淋巴结转移(P=0.001)有关,差异具有显著统计学意义,与患者的性别、年龄、肿瘤大小及是否存在远处转移无明显相关性。