应用LPS 1μg/ml刺激24h,检测TLR4 m RNA和蛋白表达情况,计算抑制效率;检测NF-κB、HIF-1α、VEGF

应用LPS 1μg/ml刺激24h,检测TLR4 m RNA和蛋白表达情况,计算抑制效率;检测NF-κB、HIF-1α、VEGF m RNA和蛋白表达情况(4)MTT法检测LPS刺激前后control group、sh RNA1-TLR4 group和sh RNA2-TLR4 BAY 11-7082细胞系group三组细胞增殖情况;流式细胞仪测定细胞周期分布情况;(5)划痕愈合实验(Wound healing)实验测定LPS刺激前后三组细胞迁移能力;(6)成管实验观察三组细胞成管能力。结果1.(1)颈总动脉球囊损伤模型手术成功率81.8%;(2)高脂喂购买PKC412养后兔血脂水平明显升高,但各组同一时点无统计学差异(p>0.05);(3)HE染色结果显示,实验组大部分颈总动脉有粥样硬化斑块形成,si RNA-TLR4组较其他各组内膜/中膜厚度比、斑块面积百分比减少;免疫组化提示颈总动脉粥样斑块内有CD31、HIFCH5183284研究购买-1α表达,且在si RNA-TLR4组的表达小于其他各组;TUNEL法染色提示,实验各组斑块内有细胞凋亡的发生,si RNA-TLR4组的表达小于其他各组(p<0.05);(4)RT-PCR、Western-blot提示si RNA-TLR4组的TLR4、NF-κB、HIF-1α、VEGF表达水平较模型组下降(p<0.05)。

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