结论1.上调的CLK2蛋白能够促进肝癌增殖、迁移、侵袭及成瘤能力;2.CLK2可能通过启动WNT/β-catenin信号通路参与到肝癌的发生发展中。第三部分miRNA-497/CLK2信号调节轴在肝癌进展中的作用目的利用生物信息学技术对能够靶向CLK2基因的microRNA进行筛选和鉴定,并且在体外验证此microRNAAntidiabetic Compound Library clinical trial对肝癌细胞生物学行为的影响方法1.在肝癌细胞中过表达或抑制miR-497,应用RT-PCR方法和Westernblot分别检测CLK2表达水平变化,并分析miR-497和CLK2的表达相关性。2.利用双荧光素酶试验验证miR-497对CLK2的靶向结合调控作用。3.细胞生物行为的功能回复实验分别selleck HPLC控制建立过表达miR-497-mimics组和CLK2、miR-497mimics&CLK2组后,检测研究其对肝癌细胞的生长增值(CCK-8)、迁移(细胞划痕)、侵袭(transwell)和克隆形成的生物学行为的影响,明确miR-497是否通过调控CLK2抑制肝癌细胞恶性表型。4.下游通路蛋白的功能Selleck CP 868596回复实验进一步利用Westernblot方法检测miR-497-mi mics 组和 miR-497mimics&CLK2 组 CLK2 表达水平与 WNT/β-catenin 通路相关蛋白WNT-3a和β-catenin的表达,明确miR-497是否通过调控CLK2参与启动W NT/β-catenin 通路。结果1.生物信息学分析结果提示CLK2可能是miR-497的靶基因。