方法根据PLK1基因序列特点,设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子(small interfering RNA,si RNA),转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和TRAP-ELISA方法检测PLK1基因转染对大肠癌细胞增殖和端粒酶活www.selleckchem.cn/products/cilengitide-emd-121974-nsc-707544.html性的影响。结果所设计的5个si RNA均能明显抑制大肠癌SW480细胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好。以P4转染处理大肠癌细胞后,PLK1 mRNA水平和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性。MTT和TRAP-ELISA方法检测发现,P4si RNA转染组细胞增殖和端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和JNK抑制剂时间依赖性(P<0.05,P<0.05)。结论PLK1基因对大肠癌细胞增殖具有重要的调控作用;以PLK1 si RNA转染处理大肠癌细胞,可明显抑制大肠癌细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关。"
“目的:观察复方六月雪(CLYX)对鸭乙型肝炎病毒乙型肝炎表面抗原(DHBsAg)和乙型肝炎E抗原(DBMS-387032体外HBeAg)的抑制作用。方法:采用1d龄雏鸭接种广西麻鸭DHBV强阳性血清,13d后用聚合酶链式反应(PCR)法筛选出DHBV强阳性鸭。随机分成5组:CLYX高、中、低剂量和模型、阳性对照组,每组10只,各组雏鸭均灌胃给药14d。于用药前(T0)、用药7d(T7)和14d(T14)及停药后3d(P3)分别采血,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定上清液DHBsAg和DHBeAg的滴度。