取各组对数生长期的待测肿瘤细胞,接种到6孔培养板中,H1688细胞每孔接种4×105个细胞,H146细胞每孔接种1×106个细胞,

取各组对数生长期的待测肿瘤细胞,接种到6孔培养板中,H1688细胞每孔接种4×105个细胞,H146细胞每孔接种1×106个细胞,同时置于37℃5%CO2条件下静止培养,待细胞融合率达100%时划痕,并给予6Gy照射。照射后,因细胞的增殖能力不一样,H1688于照射后不同时间点(0h、12h、24h)在同一位置拍照,而H146于照射后不selleck化学同时间点(0h、48h、96h)在同一位置拍照,并用Image-Pro Plus6.0软件测量划痕距离,计算划痕愈合率。实验分为2个大组,分别为H1688组(H1688、H1688/NC/sh、H1688/1079/sh、H1688/1564/sh、 H1688/NC/mgat5、H1688/mgat5)和H1还有46组(H146、H146/NC/sh、H146/1079/sh、 H146/1564/sh、H146/NC/mgat5、H146/mgat5),每组重复例数为9。 (3)平板克隆形成实验检测pGPU6/GFP/Neo GnT-VshRNA、 GV230/EGFP/Neo MGAT5干扰后对贴壁细胞H1688照Thiazovivin核磁射后克隆形成能力的影响 取各组对数生长期的待测细胞,接种于6孔板,每孔300个细胞,24h后分别给予OGy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy五个剂量点照射,然后置于37℃含5%CO2条件的培养箱内静止培养,待出现肉眼可见克隆时,终止培养,约10天左右。其后加入4%多聚甲醛固定15min,晾干后用0.1%的结晶紫染色20min,并计数细胞数大于50个的克隆总数。通过克隆数计算出细胞生存分数。

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