方法 用不同浓度的土木香内酯处理食管癌EC9706细胞,以DMSO处理的EC9706细胞作为对照组。分别用结晶紫染色法、MTT法和

方法 用不同浓度的土木香内酯处理食管癌EC9706细胞,以DMSO处理的EC9706细胞作为对照组。分别用结晶紫染色法、MTT法和克隆形成实验检测土木香内酯对EC9706增殖能力的影响;划痕愈合实验和Transwell小室法检测对EC9706细胞迁移和侵袭能力的影响;Hoechst 33258染色法检测对通常EC9706细胞凋亡的影响。蛋白印迹法检测侵袭转移相关蛋白基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)、MMP-9、波形蛋白(Vimentin)和Snail,以及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、剪切型-caspase 3(cleaved-cMAPK Inhibitor Libraryaspase 3)、caspase 3蛋白的表达水平。分别采用荧光素酶报告法和蛋白印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路的活性及相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期相关蛋白D1(cyclin D1)和c-Myc的表达水平。结果 与对照组相比,土木香内酯可以明HKI-272核磁显抑制EC9706细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡(P值均<0.01),呈剂量和时间效应关系。不同浓度的土木香内酯均能上调凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase 3和caspase 3的表达水平(P值均<0.01),下调抗凋亡蛋白Bcl-2、侵袭转移相关蛋白MMP-7、MMP-9、Vimentin和Snail的表达水平(P值均<0.01)。

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