2).用免疫印迹检测BRCA1/2与Aurora-A之间的关联。 3).通过细胞计数和软琼脂克隆试验分别绘制细胞生长曲线和克隆形成率柱状图。 4).用流式细胞术检测细胞周期进展。 5).细胞放化疗处理后用流式细胞术检测细胞凋亡水平。 6).免疫印迹检测BRCA1/2对DNA损伤应答蛋白(p53, pp53, ATM, Chk2, RAD51, yH2AX)的影响。 结果RAD001数据表： 第一部分 Aurora-A可促进细胞增殖,细胞周期进展和软琼脂克隆形成,而Aurora-A沉默可抑制细胞增殖,细胞周期进展和克隆形成。 第二部分 放化疗处理后,Aurora-A转入的细胞系凋亡明显降低,而Aurora-A沉默或者用Aurora-A抑制剂VX680处理的细胞系凋亡明显增加；顺铂处理后,Aurora-A转入的细胞系IC50增加,AUY922而Aurora-A沉默的细胞系IC50降低。 第三部分 第一章.Aurora-A降低了放射后γH2AX灶点形成,且Aurora-A可异常调节DNA损伤应答。 第二章.ATM抑制剂可增加放化疗引起的肿瘤细胞凋亡,并且影响DNA损伤应答蛋白表达。 第三章.BRCA1/2与Aurora-A负相关,且BRCA1/2可抑制细胞增殖,体外克隆形成和细胞周期JNK抑制剂进展,并可通过影响DNA损伤应答增加放化疗引起的细胞凋亡。 结论： 研究发现,Aurora-A过表达可促进肿瘤细胞增殖,细胞周期进展,软琼脂克隆形成,并可直接或者间接通过上调ATM表达,下调BRCA1/2表达,调节DNA损伤应答,促进肿瘤放化疗抵抗；相反的,Aurora-A沉默可抑制细胞增殖,细胞周期进展,软琼脂克隆形成,并可直接或者间接通过下调ATM表达,上调BRCAl/2表达,调节DNA损伤应答,促进肿瘤放化疗敏感。